簡(jiǎn)要描述:PS-304 不銹鋼開口直壁容器用于蛔蟲卵測(cè)定、沉淀集卵法,容量:10L帶刻度,配套 1ML 網(wǎng)格 浮游生物計(jì)數(shù)框 和 5ML S型 浮游生物計(jì)數(shù)框
詳細(xì)介紹
品牌 | 其他品牌 | 產(chǎn)地類別 | 國(guó)產(chǎn) |
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè),地礦 |
PS-304 不銹鋼開口直壁容器
蛔蟲卵測(cè)定、沉淀集卵法
容量:10L帶刻度
配套 1ML 網(wǎng)格 浮游生物計(jì)數(shù)框 和 5ML S型 浮游生物計(jì)數(shù)框
沉淀集卵法主要通過(guò)樣品濃縮,雜質(zhì)分離,鏡檢計(jì)數(shù)等環(huán)節(jié)對(duì)水中蠕蟲卵進(jìn)行測(cè)定,用60目篩網(wǎng)過(guò)濾去除樣品中較大的雜質(zhì),利用回傳卵比重大于水和易于沉淀的特定特性過(guò)夜沉淀濃縮水樣,用虹吸的方法棄去上清液,用表面活性劑吐溫80作為殘液及沉淀轉(zhuǎn)移時(shí)的清洗劑,進(jìn)一步離心濃縮轉(zhuǎn)移的剩余物,收集到的濃縮物用乙酸-乙酸鈉緩沖液混勻控制溶液PH值,獲得最佳親水-親脂平衡,加入乙酸乙酯吸收水中的脂肪類雜質(zhì)使蛔蟲卵更易下沉,再次離心濃縮樣品并棄去上部脂肪雜質(zhì)層及緩沖液層,獲得的含卵沉淀層用飽和硝酸鈉溶液混勻,于計(jì)數(shù)框中靜置漂浮后鏡檢,即可測(cè)得水樣中蛔蟲卵的數(shù)量。
不銹鋼開口直壁容器10L(蛔蟲卵測(cè)定)蛔蟲卵測(cè)定 沉淀集卵法:
蛔蟲卵分受精卵和未受精卵。受精卵呈寬橢圓形。蛔蟲卵一旦進(jìn)入人體,在它發(fā)育到成熟的整個(gè)過(guò)程中都會(huì)給人體造成危害?;紫x卵在土壤、肥料、人體等自然界廣泛存在!防止糞便污染環(huán)境是切斷蛔蟲傳播途徑的重要措施。
蛔蟲卵死亡率直接影響肥料的效果,可采用五格三池貯糞法,使糞便中蟲卵大部分沉降在池底。由于糞水中游離氨的作用和厭氧發(fā)酵,蟲卵可被殺滅,同時(shí)也會(huì)增加肥效。在用于糞做肥料的地區(qū),可采用泥封堆肥法,三天后,糞堆內(nèi)溫度可上升至52℃或更高,可以殺死蛔蟲卵。
那么蛔蟲卵死亡率又是如何測(cè)定的呢?依據(jù)GB/T 19524.2—2004如下:將堿性溶液與肥料樣品充分混合,分離蛔蟲卵,然后用密度較蛔蟲卵密度大的溶液為漂浮液,使蛔蟲卵漂浮在溶液的表面,從而收集檢驗(yàn)。
1、蛔蟲卵分離
稱取5.0~10.0 g樣品(顆粒較大的樣品應(yīng)先進(jìn)行研磨),放于容量為50 mL離心管中,注入NaOH溶液25~30 mL,另加玻璃珠約10粒,用橡皮塞塞緊管口,放置在振蕩器上,靜置30 min后,以200~300 r/ min頻率振蕩10~15 min。振蕩完畢,取下離心管上的橡皮塞,用玻璃棒將離心管中的樣品充分?jǐn)噭?,再次用橡皮塞塞緊管口,靜置15~30 min 后,振蕩10~15 min。
2、離心沉淀
從振蕩器上取下離心管,拔掉橡皮塞,用滴管吸取蒸餾水,將附著于橡皮塞上和管口內(nèi)壁的樣品沖入管中,以2000~2500 r/ min速度離心3~5 min后,棄去上清液。然后加適量蒸餾水,并用玻璃棒將沉淀物攪起,按上述方法重復(fù)洗滌三次。
3、 離心漂浮
往離心管中加入少量飽和 NaNO3 溶液,用玻璃棒將沉淀物攪成糊狀后,再徐徐添加飽和 NaNO3 溶液,隨加隨攪,直加到離管口約1 cm為止,用飽和 NaNO3 溶液沖洗玻璃棒,洗液并入離心管中,以2000~2500 r/ min速度離心3~5 min。
用金屬絲圈不斷將離心管表層液膜移于盛有半杯蒸餾水的燒杯中,約30次后,適當(dāng)增加一些飽和NaNO3 溶液于離心管中,再次攪拌、離心及移置液膜,如此反復(fù)操作3~4次,直到液膜涂片觀察不到蛔蟲卵為止。
4、抽濾鏡檢
將燒杯中混合懸液,通過(guò)覆以微孔火棉膠濾膜的高爾特曼氏漏斗抽濾。若混合懸液的渾濁度大,可更換濾膜。
抽濾完畢,用彎頭鑷子將濾膜從漏斗的濾臺(tái)上小心取下,置于載玻片上,滴加二、三滴甘油溶液,于低倍顯微鏡下對(duì)整張濾膜進(jìn)行觀察和蛔蟲卵計(jì)數(shù)。當(dāng)觀察有蛔蟲卵時(shí),將含有蛔蟲卵的濾膜進(jìn)行培養(yǎng)。
5 、培養(yǎng)
在培養(yǎng)皿的底部平鋪一層厚約1 cm 的脫脂棉,脫脂棉上鋪一張直徑與培養(yǎng)皿相適的普通濾紙。為防止霉菌和原生動(dòng)物的繁殖,可加入甲醛溶液或甲醛生理鹽水,以浸透濾紙和脫脂棉為宜。
將含蛔蟲卵的濾膜平鋪在濾紙上,培養(yǎng)皿加蓋后置于恒溫培養(yǎng)箱中,在28 ℃~30 ℃ 條件下培養(yǎng),培養(yǎng)過(guò)程中經(jīng)常滴加蒸餾水或甲醛溶液,使濾膜保持潮濕狀態(tài)。
6、 鏡檢
培養(yǎng)10~15 d ,自培養(yǎng)皿中取出濾膜置于載玻片上,滴加甘油溶液,使其透明后,在低倍鏡下查找蛔蟲卵,然后在高倍鏡下根據(jù)形態(tài),鑒定卵的死活,并加以計(jì)數(shù)。鏡檢時(shí)若感覺(jué)視野的亮度和膜的透明度不夠,可在載玻片上滴一滴蒸餾水,用蓋玻片從濾膜上刮下少許含卵濾渣,與水混合均勻,蓋上蓋玻片進(jìn)行鏡檢。
7、 判定
凡含有幼蟲的,都認(rèn)為是活卵,未孵化或單細(xì)胞的都判為死卵。
8、 結(jié)果計(jì)算
式中:
K —蛔蟲卵死亡率(%)
N1—鏡檢總卵數(shù)
N2—培養(yǎng)后鏡檢活卵數(shù)
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